Essere in grado di monitorare le colture cellulari nel tempo fornisce una visione approfondita della loro dinamica e funzione. I microscopi di imaging cellulare dal vivo aprono nuove ed entusiasmanti strade per studiare la salute delle cellule, la vitalità, la formazione di colonie, la migrazione e le risposte cellulari a fattori esterni.
Per aiutare i ricercatori nelle scienze della vita a continuare a migliorare la loro comprensione dei processi cellulari, CytoSMARTTM Technologies ha sviluppato un microscopio da laboratorio automatizzato a campo chiaro che visualizza interi supporti per colture cellulari e opera all'interno di incubatori standard a CO2 ed esegue analisi cinetiche creando video in time-lapse che catturano il comportamento cellulare per giorni o addirittura settimane.
| Produttore | CytoSMART™ |
|---|---|
| Tecnica | Live-cell imaging |
| Applicazione | Cell Imaging |
L'imaging in time-lapse consente di individuare eventi importanti nella progressione della coltura cellulare da un esperimento all'altro ed eseguire analisi cinetiche nel corso di giorni o addirittura settimane. L'imaging consente di scoprire i tassi di adesione e distacco, valutare eventi come la morte cellulare e confrontare le curve di crescita. La raccolta dei dati mediante monitoraggio video consente agli utenti di rilevare cambiamenti all'interno dei campioni e confrontare la velocità di questi cambiamenti tra un campione e l’altro.
La manipolazione manuale e la semina delle cellule possono causare una distribuzione di densità variabile all'interno delle fiasche. La selezione casuale di diverse aree di interesse o la scansione e lo stitching delle immagini è pratica comune per superare questo problema, tuttavia questo richiede tempo per l'impostazione o l’elaborazione a posteriori. CytoSMARTTM Omni scansiona automaticamente l’intera superficie di ogni pozzetto e unisce istantaneamente queste immagini per offrire agli utenti una panoramica completa della confluenza cellulare.
Le analisi basate su cellule e la subcoltura traggono tutti vantaggio dalla standardizzazione. La scelta del supporto giusto e il processo di comprensione di come si comportano le cellule in detto supporto è vitale per la riproducibilità. CytoSMARTTM Omni è altamente flessibile ed è compatibile con qualsiasi supporto trasparente di spessore inferiore a 55 mm. Tutti i supporti con una superficie inferiore a 99x131 mm possono essere acquisiti per intero.
CytoSMARTTM Omni genera video time-lapse con dettagli a livello di singole cellule; le immagini dell'intero pozzetto vengono create ogni ora scansionandone l’intera superficie e unendone automaticamente le immagini.
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L'analisi delle immagini può essere utilizzata per estrarre informazioni preziose dai video in time-lapse. L’utilizzo del software di monitoraggio cellulare permette di indagare e confrontare parametri come la confluenza cellulare, l'infiltrazione dell'area (test di wound healing) e le curve di crescita.
I sistemi di imaging di cellule vive richiedono il controllo ambientale durante l'esperimento. Per garantire le corrette condizioni ambientali, gli utenti possono posizionare CytoSMARTTM Omni all'interno di qualsiasi incubatore standard di colture cellulari. Le curve morbide della piattaforma CytoSMARTTM Omni garantiscono il minimo disturbo del flusso d'aria. Ciò assicura che i campioni rimangano nell'ambiente desiderato e omogeneo durante l'intero esperimento.
L'acquisizione di immagini può disturbare fortemente le cellule viventi. Lo shock ambientale, come i cambiamenti improvvisi nell'atmosfera e i disturbi meccanici, possono influenzare negativamente la vitalità cellulare. CytoSMARTTM Omni acquisisce rapidamente immagini in campo chiaro con dettagli a livello di singola cellula senza disturbare le cellule. Gli utenti possono impostare i parametri di imaging desiderati utilizzando il proprio computer e lo strumento seguirà quel regime di scansione. In nessun momento occorre spostare la coltura dopo aver posizionato le cellule sul supporto. L'imaging in time-lapse automatizzato elimina la necessità di qualsiasi interferenza manuale. L’utilizzo di un sistema così stabile previene disturbi indesiderati e riduce gli artefatti di imaging.
Un’alternativa non invasiva ai metodi classici per la misura della vitalità è la confluenza. Elaborando immagini con il CytoSMART® Omni di cellule coltivate in diversi momenti, la vitalità può essere monitorata nel corso del tempo senza bisogno di reagenti tossici o campioni destinati ad andare perduti, riducendo così la quantità di campioni necessari.
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