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Serie Pioneer

Sensibilità ed innovazione

Il Pioneer è una piattaforma SPR ad alte prestazioni e completa automazione. Inalzando ancora il livello dell'analisi label-free delle interazioni biomolecolari, il Pioneer è stato disegnato per fornire dati di massima accuratezza anche nei casi più estremi, come il drug discovery, lo studio di piccole molecole anche <70Da, lo studio d'interazioni deboli, etc. Ultra sensibile, il Pioneer rimane ideale anche per applicazioni più tradizionali come la selezione e lo screening di anticorpi, il ligand fishing o lo studio d'interazioni proteina-proteina. Il Pioneer offre in esclusività l'innovativa tecnologia diSPR con l'iniezione OneStep™ a gradiente continuo, che oltre a consentire la determinazione di tutte le costanti dell'interazione in un'unica iniezione consente il calcolo del coefficiente di diffusione dell'analita per la stima del peso molecolare in soluzione, molto utile per la risoluzione delle interazioni complesse coinvolgendo ad esempio diversi siti, cambiamenti conformazionali o aggregazione.

2017 Brochure Serie Pioneer
Produttore Pall ForteBio
Applicazione Stabilità, Aggregazione, Interazioni, Label-free


Con 3 canali e 2 piastre porta campioni da 96 o 384 pozzetti, il Pioneer offre una grande capacità di through-put e una massima flessibilità nell'impostazione degli esperimenti grazie a numerose tipologie d'iniezione (simultanee, in sequenza, multipla, fast, etc.), trasferimento, miscela e diluizioni automatiche, controllo di temperatura dell'analisi e dell'autocampionatore indipendenti, e la possibilità di programmare esperimenti SPR fino a 72 ore di autonomia.   

Pioneer FE, progettato specificatamente par il FBLD o FBDD*

Ultimo nato della serie Pioneer, il Pioneer FE è stato disegnato per affrontare le sfide legate allo screening di frammenti o piccole molecole. Il Pioneer FE fornisce i dati di affinità (KD) dai screen primari e consente così d'individuare rapidamente i leads tra i candidati. Associando l'innovativa Dynamic Injection SPR (diSPR®) e l'unico Actives Selection Software appositamente sviluppato, il Pioneer FE offre un significativo guadagno di tempo nei screening per l'identificazione e la caratterizzazione label-free di principi attivi.

*Fragment-Based Lead Discovery o Fragment-Based Drug Discovery  

Perché scieglere il Pioneer FE con la diSPR® e l'Actives Selection Software?

  • Per essere in grado di prendere decisioni in fase iniziale di screening grazie a dati affidabili di affinità (KD) e dati cinetici (ka, kd) direttamente dallo screen primario.
  • Per ottenere i primi risultati più rapidamente: completamente automatizzato, il Pioneer FE richiede uno sviluppo metodo minimale per arrivare ad identificare i candidati (o il candidato).
  • Per ottimizzare i flussi di lavoro: identificazione automatica ed affidabile dei leads e simultanea eliminazione dei candidati negativi.
  • Per la riproducibilità dei risultati: approccio oggetivo d'identificazione dei leads.
  • Per una maggiore fiducia nella selezione dei hits grazie all'Actives Selection Software, 'primo della classe' validato dall'industria.
  • Per l'alta capacità di through-put: fino a 768 campioni in 24 ore.

Actives Selection Software: identificazione dei frammenti positivi

L'analisi dei dati di screening di librerie di frammenti o piccole molecole può richiedere giorni di lavoro per 1 singolo screen. Un software di selezione dei leads integrato al software d'analisi dei dati costituisce un aiuto decisivo per velocizzare il trattamento dei dati. Un nuovo metodo di selezione dei candidati positivi è stato sviluppato in collaborazione con i ricercatori di Genentech e GlaxoSmithKline ed implementato all'interno del pacchetto software d'analisi dei dati QDat. I dati di screening provvenienti da diversi sensori (chips), diversi giorni, diversi utilizzatori o diversi strumenti vengono normalizzati in modo da consentire i paragoni per un'intera campagna di screening e la selezione dei lead da un set globale di dati. 

Specifiche tecniche

PIONEER PIONEER FE
N° di canali della cella a flusso : 3 idem
Campo di indici di Rifrazione: 1.33 - 1.40 idem
Rumore a breve termine: < 0.1 RU Rumore a breve termine: < 0.035 RU
Rumore a lungo termine: < 0.3 RU/min idem
Flow Rate: 0.1-150 μl/min. idem
Volume di iniezione: 2-700 μl idem
Controllo della temperatura : da 4°C a 40° C bi-zona indipendente (piastre e cella) idem
Limite di rivelabilità : <70 Da idem
Volume morto tra i due canali: < 20 nl idem
Sottrazione del riferimento in tempo reale: Si idem
Caricamento del campione: automatico idem
Capacità: 2 piastre porta campioni Capacità: 2 piastre porta-campioni + 2 piastre reagenti
Configurazione piastre porta-campioni: 96 pozzetti, 384 pozzetti o piastra mista piccoli/grandi volumi idem
Robot XYZ : trasferimento, diluizioni e caricamento automatici idem
Iniezioni simultanee: Si (2 loop d'iniezione) idem
Iniezioni a gradiente: Si Iniezioni a gradiente: Si, OneStep, NeXtStep 0.1-200uL/min                     
Degassaggio in linea dei buffer: Si idem
Acquisizione dati variabile: 1-20 Hz idem
Automazione: fino a 72 ore idem
ka : 102-108 M-1.s-1 ka : 102-109 M-1.s-1
kd :10-6-0.1 s-1 kd :10-6-2.5 s-1
KD 10-3 - 10-12 M
Concentration 10-3 - 10-12 M


COOH1

Il biosensore COOH1 è una chimica superficiale bidimensionale a bassa capacità che comprende uno spaziatore di polietilenglicole (PEG) con acidi carbossilici terminali. Questa superficie è particolarmente utile dove può verificarsi il legame della lectina o dove non sono desiderati superfici a base Dextran. L'accoppiamento di ammine è il metodo standard di immobilizzazione per COOH1 e la sua capacità di accoppiamento è il più basso dei biosensori carbossilici. Gli usi tipici sono saggi cinetici di grandi molecole (> 25 kDa).

COOH2

Il biosensore COOH2 è una chimica tridimensionale di media capacità che comprende un distanziatore Destrano corto con acidi carbossilici. Il distanziatore Dextran è eccellente per ridurre il legame non specifico ed è biocompatibile con un'ampia gamma di molecole. L'accoppiamento delle ammine è il metodo standard di immobilizzazione per COOH2 e la sua capacità di accoppiamento è tra i biosensori COOH1 e COOHV. Gli usi tipici sono la cinetica intermedia (> 1 kDa) alla grande molecola (> 25 kDa).

COOH5

Il biosensore COOH5 è una chimica tridimensionale ad alta capacità che comprende un distanziale idrogel di polisaccaride carbossilato. Questa superficie è utile quando non si desidera un idrogel a base di destrano. Questo biosensore contiene un'alta densità di gruppi funzionali di acido carbossilico che consente di accoppiare una grande quantità di target sulla superficie. Ciò è particolarmente utile per osservare le interazioni di piccole molecole o per bersagli che mostrano una bassa attività di legame. L'accoppiamento delle ammine è il metodo standard di immobilizzazione per COOH5 e la sua capacità di accoppiamento è il più alto dei biosensori carbossilici.

      

COOHV

Il biosensore COOHV è una chimica tridimensionale ad alta capacità che utilizza un distanziale di destrano di media lunghezza con acidi carbossilici. Questo biosensore contiene un'alta densità di gruppi funzionali di acido carbossilico che consente di accoppiare una grande quantità di target sulla superficie. Ciò è particolarmente utile per osservare le interazioni di piccole molecole o per target che mostrano un'attività di legame bassa. L'accoppiamento delle ammine è il metodo standard di immobilizzazione per COOH e la sua capacità di accoppiamento è superiore ai biosensori COOH2.

HISCAP

Il biosensore HisCap è una chimica dell'idrogel tridimensionale derivata dal biosensore COOH5. È modificato con gruppi funzionali di acido nitrilotriacetico (NTA) che chelano gli ioni di nichel per la cattura selettiva di bersagli con la sigla 6X e 10X. Questa superficie può essere parzialmente rigenerata iniettando Imidazolo, EDTA o altri reagenti simili che competono per il nichel. Gli usi tipici sono piccole molecole o cinetiche peptidiche con bersagli proteici marcati His.

BIOCAP

Il biosensore BioCap è una chimica tridimensionale derivata dal biosensore COOHV. È stato preimmobilizzato con la proteina legante la biotina di NeutrAvidin per consentire la cattura selettiva irreversibile di ligandi contenenti biotina. Il pI quasi neutro del NeutrAvidin contribuisce al basso legame non specifico su questa superficie. Gli usi tipici sono la cinetica delle molecole intermedie (> 1 kDa) a quelle grandi (> 25 kDa).

AVCAP

Il biosensore AvCap è una chimica tridimensionale derivata dal biosensore COOHV. È modificato con gruppi funzionali di Biotina su un breve distanziatore che consente la cattura selettiva irreversibile delle proteine ​​di Avidin. Questa chimica è utile per catturare i coniugati preparati con le proteine ​​di Avidin.

L'utilità della diSPR in FBDD - Testimonial Genentech

Presentazione di 24 slides descrivendo perché e come la tecnica diSPR (Dynamic Injection Surface PLasmon Resonance) si è rivelata utilissima in Genentech per gli esperimenti di Fragment Based Drug Discovery.


diSPR e Fragment Based Drug Discovery

Questo documento descrive l'utilità dell'innovativa tecnica Dynamic Injection Surface Plasmon Resonance diSPR® per il Fragment Based Lead Discovery, o come velocizzare la presa di decisione, grazie a dati di affinità ottenuti già dallo screening primario.


Monitoraggio di binding multi-siti con SPR

L’innovativo sistema di iniezione OneStep, implementato sulla piattaforma SPR Pioneer, permette di ottenere un gradiente di concentrazioni dell’analita di diversi ordini di grandezza. L’alta risoluzione dei risultati, garantita proprio dal continuo range di concentrazioni generato, permette di discriminare diversi modelli di interazione e risolvere interazioni complesse come legami multisito, con una unica iniezione.


diSPR e aggregazione

La piattaforma SPR Pioneer di SensiQ implementa l’innovativo sistema di iniezione diSPR OneStep grazie al quale è possibile rilevare lo stato di aggregazione di un campione biomolecolare e misurare tutte le costanti dell’interazione, simultaneamente ed in un unico esperimento.

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