Field-Flow Fractionation

‘Field-Flow Fractionation’ o FFF indica una famiglia di tecniche per la separazione in fase liquida di biomolecole o nano-particelle di qualsiasi tipo, come proteine, anticorpi, polisaccaridi o nano-particelle, nel range da 1 nanometro a 100 microns. Il campione viene separato all’interno di un canale a flusso, ovvero una colonna senza fase stazionaria o solida, questo la rende una tecnica “gentile” perfetta per la separazione di aggregati fragili o sensibili alle pressioni elevate.

Le varie tecniche FFF, per il mondo bio, usano lo stesso principio di base ma si differenziano dalle forze di separazione utilizzate: flusso di liquido, forza centrifuga o campi di gravità. Queste forze vengono applicate perpendicolarmente al canale e si oppongono all’effetto della diffusione delle particelle nel liquido creando diversi strati dove si distribuiscono le particelle del campione: le particelle piccole si dispongono negli strati veloci mentre le particelle grandi negli strati lenti del flusso laminare all’interno del canale.

L’eluizione attraverso il canale trasporta tanto più velocemente le particelle tanto più piccole sono, perciò le particelle più grandi saranno eluite per ultime. La Postnova propone varie tecniche FFF che usano le seguenti forze di separazione:

• Flow FFF : flusso di liquido
• Elettrical Flow FFF: flusso di liquido e campo elettrico
• Centrifugal FFF: forza centrifuga
• Splitt FFF: forza di gravità (sedimentazione)

Multiflow FFF: Separazione universale

La tecnica Flow FFF usa come forza di separazione un flusso di liquido perpendicolare al flusso del canale. Grazie alla diffusione dinamica, le bomolecole del campione vengono separate in base alla loro dimensione o peso molecolare. La Flow FFF è la tecnica ideale per la separazione e la caratterizzazione di campioni complessi in cui sono simultaneamente presenti polisaccaridi, proteine, anticorpi, vescicole (esosomi e vescicole extracellulari), virus e nano-particelle.La tecnica può essere adottata per la quantifica di principi attivi liberi o rilasciati da carrier e misura dell’efficienza di incapsulamento (drug-encapsulation efficency).

Centrifugal FFF: Separazione di particelle

La centrifugal FFF usa la forza centrifuga come forza di separazione. Le particelle vengono separate in funzione del loro coefficiente di diffusione, in base sia alla dimensione che alla densità. Questa proprietà unica consente di separare particelle della stessa dimensione ma costituite da materiali diversi. Questa tecnica è ideale per la separazione aggregati proteici differenziandoli da eventuali goccioline di olio o aggregati particellari estranei.

Splitt FFF: Separazione preparativa di microparticelle

La Splitt FFF usa la forza di gravità per il frazionamento preparativo di microparticelle o cellule. Le particelle/cellule sono separate in funzione della loro dimensione e densità, ma anche della loro forma. A seconda della dimensione del canale utilizzato si possono raccogliere da milligrammi a grammi di materiale. La Splitt FFF è ideale per la separazione di cellule, micro particelle, plancton, diatomee, etc.

Detectors e vari moduli

La tecnica FFF prevede, oltre al sistema di separazione e di campionamento, i tipici detectors di cromatografia liquida per la caratterizzazione delle particelle o biomolecole in uscita.

Tutti i sistemi FFF della Postnova sono piattaforme modulari per una maggiore flessibilità e robustezza. Tutti i sistemi sono gestiti dall’unico software Nova FFF Suite che controlla l’intera piattaforma, dall’autocampionatore ai vari detectors.
La Postnova propone, oltre ai sistemi FFF completi, i singoli moduli e detectors: Postnova consente così di interfacciare la FFF a strumentazione e detectors già esistenti per una massima flessibilità. In collaborazione con Malvern Instruments, la Postnova propone come detector DLS per i suoi sistemi FFF lo Zetasizer Nano S, strumento di riferimento -leader del mercato- per la caratterizzazione di nanoparticelle e biomolecole.

Clicca sulle foto qui sotto per maggiori informazioni sui moduli FFF della Postnova.

Detector DLS Zetasizer Nano	Detectors Multiangle LS	Detectors RI, UV, Fluo, etc.	Auto campionatori	Temperatura